色婷婷久久,国产中文字幕流白浆免费,日本精品视频一区二区,欧美国产1区

您好!歡迎訪問上海牧榮生物科技有限公司網站!
咨詢熱線

17621170138

當前位置:首頁 > 技術文章 > 制備過表達慢病毒的方法介紹

制備過表達慢病毒的方法介紹

更新時間:2025-01-07      點擊次數:1040

過表達慢病毒是一種基于慢病毒載體的基因傳遞系統。慢病毒是一類單鏈RNA病毒,其基因組可以整合到宿主細胞的染色體上,從而實現長期穩定的基因表達。通過將目的基因克隆到慢病毒載體中,利用慢病毒的包裝質粒和輔助質粒共同轉染到包裝細胞中,經過包裝、成熟和釋放等過程,獲得含有目的基因的慢病毒顆粒。這些慢病毒顆粒可以感染宿主細胞,將目的基因整合到宿主細胞的染色體上,實現目的基因的過表達。制備方法如下:

       1.目的基因的克隆:需要將目的基因克隆到慢病毒載體中。常用的慢病毒載體有pLenti6/V5-DEST、pLenti-CMV/TO-Puro-DEST等。將目的基因插入到慢病毒載體的多克隆位點,構建重組質粒。

 
  2.包裝細胞的培養:常用的包裝細胞有293T、293FT等。將這些細胞培養至適當的密度,以便于后續的轉染實驗。
 
  3.轉染實驗:將重組質粒與慢病毒的包裝質粒和輔助質粒共同轉染到包裝細胞中。常用的轉染方法有磷酸鈣沉淀法、脂質體介導法等。
 
  4.病毒收集與純化:轉染后48-72小時,收集包裝細胞上清液,通過超速離心、過濾等步驟,純化得到高滴度的慢病毒顆粒。
 
  5.病毒滴度測定:通過熒光定量PCR、流式細胞術等方法,測定慢病毒顆粒的滴度,以便后續的感染實驗。
 
  過表達慢病毒的應用:
 
  1.基因功能研究:通過感染宿主細胞,實現目的基因的過表達,從而研究該基因在細胞生長、凋亡、分化等過程中的作用。
 
  2.藥物篩選:通過感染腫瘤細胞,建立穩定的藥物篩選模型,用于抗腫瘤藥物的篩選和評價。
 
  3.基因治療:通過感染患者細胞,實現目的基因的過表達,從而達到治療疾病的目的。例如,可以用于治療遺傳性疾病、免疫缺陷病等。


掃一掃,關注微信
地址:上海市嘉定區安亭鎮新源路155弄16號新源商務樓718室 傳真:Shanghai Mulong Biotechnology
©2025 上海牧榮生物科技有限公司 版權所有 All Rights Reserved.  備案號:滬ICP備2022017655號-1
主站蜘蛛池模板: 樟树市| 洪洞县| 昆山市| 西吉县| 怀宁县| 南溪县| 铁力市| 东光县| 防城港市| 东乌珠穆沁旗| 石城县| 扎赉特旗| 千阳县| 波密县| 鄄城县| 五常市| 醴陵市| 东源县| 科技| 锡林郭勒盟| 旅游| 博湖县| 安远县| 平果县| 克山县| 城口县| 景泰县| 镇康县| 永登县| 区。| 浙江省| 封丘县| 于都县| 克什克腾旗| 黄冈市| 张掖市| 乐安县| 印江| 宁强县| 三都| 隆化县|