垂直流動(dòng)免疫測(cè)定依賴(lài)于與更常見(jiàn)的相同的基本原理橫向流動(dòng)免疫分析做了一些修改的格式。這兩種方法之間的區(qū)別是流體的垂直和橫向流動(dòng)。然而，與傳統(tǒng)的橫向流動(dòng)分析相比，垂直流動(dòng)技術(shù)有幾個(gè)優(yōu)點(diǎn)，最重要的是減少了分析時(shí)間(< 5分鐘)，見(jiàn)表1

垂直流動(dòng)免疫測(cè)定可用于快速檢測(cè)感興趣樣品中的抗原。樣品可來(lái)自廣泛的應(yīng)用領(lǐng)域，如臨床、獸醫(yī)、農(nóng)業(yè)、食品、生物防御和環(huán)境行業(yè)。即使在復(fù)雜的樣品基質(zhì)中，檢測(cè)靈敏度通常也在較低的納克/毫升范圍內(nèi)。

表一。與橫向流動(dòng)和其他快速流動(dòng)類(lèi)型測(cè)試相比，快速垂直流動(dòng)技術(shù)的特點(diǎn)和優(yōu)勢(shì)。

垂直流動(dòng)分析是如何工作的

與橫向流動(dòng)一樣，垂直流動(dòng)免疫測(cè)定依賴(lài)于將捕獲抗體固定在試劑墊上，將感興趣的樣品(有或沒(méi)有待檢測(cè)的抗原)施加到該試劑墊上。結(jié)合抗原的檢測(cè)隨后通過(guò)抗原特異性抗體金綴合物的結(jié)合來(lái)實(shí)現(xiàn)。該步驟完成了由捕獲抗體、抗原和最終的金綴合物組成的夾心，并產(chǎn)生直接和長(zhǎng)期的視覺(jué)可檢測(cè)的紅色點(diǎn)，指示抗原的存在，圖1。

令人感興趣的是，通過(guò)使用不同類(lèi)型的納米顆粒綴合探針進(jìn)行檢測(cè)，可以容易地實(shí)現(xiàn)檢測(cè)的替代顏色。一個(gè)例子是抗體偶聯(lián)的金納米海膽，其在檢測(cè)中陽(yáng)性檢測(cè)時(shí)將產(chǎn)生藍(lán)色點(diǎn)。

圖一。分析樣品中存在(A，B)和不存在(C)目標(biāo)物時(shí)，使用金結(jié)合物(A)或金納米海膽結(jié)合物(B)后Miriad垂直流分析柱的外觀圖示。

垂直流式免疫分析中的多路復(fù)用能力

垂直流動(dòng)技術(shù)也允許容易的多路復(fù)用。在Cytodiagnostics Inc .銷(xiāo)售的Miriad垂直流檢測(cè)試劑盒中，可以在5分鐘或更短時(shí)間內(nèi)同時(shí)評(píng)估單個(gè)樣品中4種目標(biāo)的存在。

通過(guò)在膜上預(yù)定的位置和/或模式點(diǎn)樣針對(duì)不同抗原的捕獲抗體，可以容易地實(shí)現(xiàn)多重化。為了更容易觀察，這種多重化也可以與不同顏色的納米顆粒探針結(jié)合，例如使用分別具有紅色和藍(lán)色檢測(cè)顏色的金綴合物和金納米海膽綴合物。

圖二。垂直流動(dòng)免疫測(cè)定中的多重檢測(cè)。左圖顯示了3個(gè)抗原中的2個(gè)(紅點(diǎn))和對(duì)照的陽(yáng)性檢測(cè)。右圖顯示了使用兩種不同顏色的納米顆粒探針(紅色:金納米顆粒，藍(lán)色:金納米顆粒)對(duì)兩種不同抗原的陽(yáng)性檢測(cè)。